Modifika tal-fosforilazzjoni
Ir-riċerka dwar il-proteini u l-peptidi fosforilati jistgħu jgħinu lin-nies jiċċaraw il-mekkaniżmu tal-proċess ta 'hawn fuq u jifhmu aktar in-natura tal-attivitajiet tal-ħajja. F'dawn l-aħħar snin, bl-iżvilupp kontinwu tat-teknoloġija tal-proteomika, l-istudju tal-fosforilazzjoni tal-proteini irċieva attenzjoni dejjem aktar mifruxa. Ħafna tossini naturali u patoġeni jeżerċitaw ukoll l-effetti tagħhom billi jbiddlu l-istatus ta 'fosforilazzjoni ta' proteini intraċellulari.
Il-polipeptidi fosforilati jirreferu prinċipalment għas-Ser, Tyr u Thr Il-grupp ta 'hydroxyl tal-katina tal-ġenb tar-residwu huwa modifikat f'polipeptide tal-fosfat tal-aċidu. S'issa, il-modifika tal-fosforilazzjoni tal-polipeptidi tinvolvi prinċipalment il-metodu ta' post-fosforilazzjoni u Żewġ metodi ta' sinteżi:
Meta jiġi modifikat bil-metodu tal-monomeru, l-aċidu amminiku fosforilat huwa diffiċli biex jikkondensa mal-katina tal-peptide minħabba t-tfixkil steriku ikkawżat mill-grupp akbar ta 'modifika tal-katina tal-ġenb, u l-introduzzjoni sussegwenti tal-aċidu amminiku tkun aktar diffiċli. Speċjalment meta jkun fih modifiki multipli tas-sit ta 'fosforilazzjoni, is-sintesi ssir estremament diffiċli, u l-prodott finali għandu komponenti kumplessi, huwa diffiċli biex jissepara, u għandu rendiment estremament baxx. Għalhekk, meta siti multipli fil-katina tal-peptidi huma fosforilati, il-metodu ta' post-fosforilazzjoni jista' jiġi kkunsidrat. Il-proċess ta 'sinteżi prinċipali huwa li jitneħħew b'mod selettiv il-gruppi li jipproteġu l-katina tal-ġenb tal-aċidi amminiċi li għandhom jiġu ttikkettjati wara li titlesta s-sintesi tal-polypeptide. Għal Tyr, Thr Amino acids b'ktajjen tal-ġenb mhux protetti jistgħu jintużaw direttament għar-reazzjoni. Grupp li jipproteġi l-katina tal-ġenb f'1% TFA/DCM Jista 'jitneħħa kwantitattivament taħt ċerti kundizzjonijiet. Waqt post-fosforilazzjoni, bis benzyl phosphoramidite jista' jintuża. It-tetrazole jiġġenera l-intermedjarju attiv phosphoramidite tetrazole, li huwa konness mal-grupp hydroxyl, u mbagħad ossidizzat taħt kundizzjonijiet peroxyacid biex jiġġenera grupp fosforil biex tlesti r-reazzjoni.
- Aħna nipprovdu servizzi ta' modifika tal-fosforilazzjoni pSer, pTyr, pThr u D-pSer, D-pTyr, D-pThr.
- Modifiki ta 'fosforilazzjoni ta' 2 siti, 3 siti, 4 siti, u 5 siti jistgħu jitwettqu simultanjament.
Peptidi fosforilati Każ sintetiku (Thr(HPO3), Tyr(HPO3), Ser(HPO3) stenna)
1. Hemm 4 siti ta 'fosforilazzjoni fis-sekwenza (xxxpSpTxxxpSxxxpTx), Il-purità hija 95% u ċ-ċiklu ta' tlestija huwa ta '3 ġimgħat.
